Mikroskopische Färbemethoden
Botanik
Pianese-Färbung
Benötigte Chemikalien :
Malachitgrün (C.I. 42000), Säurefuchsin (C.I.42658), Martiusgelb (C.I.10315), Ethanol 92%ig, Eisessig, Isopropanol 100%ig
Bemerkung :
Speziell für Paraffinschnitte durch pilzinfizirtes Pflanzenmaterial. Zur Fixierung des Materials werden AFE- bzw. AFP-Gemische empfohlen.
Literatur :
BoMT S.227
Arbeitsablauf :
- Entparaffinierte Schnitte in Aqua dest. spülen
- Farblösung min. 45 Min.
- überschüssige Farblösung vom Objekträger ablaufen lassen.
- Differenzieren mit Essig-Ethanol ca. 1 Min.
- kurz in Ethanol 92%ig spülen
- Gründlich Entwässern in 100%igem Isopropanol min 5 Min (einmal wechseln)
- Xylol min. 3 Min
- Einschluß in neutralem Harz (z.b. Malinol, Eukitt, Entellan ...)
Ergebnis :
Wirtszellen grün, Pilzmycel leuchtend rosa
Ansätze :
- Lösung A: 0.5g Malachitgrün werden in 50ml Aqua dest. gelöst.
- Lösung B: 0.5g Säurefuchsin werden in 10ml Aqua dest. gelöst.
- Lösung C: 0.01g Martiusgelb wird in 1ml Aqua dest. gelöst.
- Farblösung: Lösung A , B , C zusammenmischen. Diese Mischung anschließend mit
89ml Aqua dest. und 50ml 92% unvergälltem Ethanol versetzen.
- Essig-Ethanol: 99ml 92%iger Ethanol werden mit 1ml Eisessig versetzt. (vergällter Ethanol ist hier verwendbar)
© by Armin Eisner