Mikroskopische Färbemethoden                  Botanik / Zoologie

Bemerkung :
Die Färbung versagt in der Regel an Materialien, die mit OsO₄-Gemischen fixiert wurden oder lange in chromsäurehaltigen Lösungen lagen.
Besonders geeignet zur Totalfärbung von Algen und Pilzen.

Literatur :  
MT68 §648 / BoMT S.117 / HistTech S.105

Arbeitsablauf :
1. Schnitte in Aqua dest. spülen.
2. Hämalaun Gebrauchslösung,   5-10 Min., bis die Kerne gut gefärbt sind (unter dem Mikroskop kontrollieren).
3. Überschüssige Farblösung vom Objektträger ablaufen lassen und mit Aqua dest. spülen bis das ablaufende Wasser farblos ist. (Objekte bzw. Schnitte sind weinrot)
4. in fließendem Leitungswasser auswaschen (Bläuen).
5. falls notwendig in einer 0.1%igen wäßrigen Natriumhydrogencarbonatlösung BLÄUEN.
6. Ist die Färbung zu dunkel ausgefallen, in 0.1%iger wäßriger Salzsäure differenzieren (unter dem Mikroskop kontrollieren). Wenn die Differenzierung das gewünschte Ausmaß erreicht hat, den Objektträger möglichst schnell in ammoniakalisches Wasser bringen. Der Objektträger bleibt hierin solange, bis sich die Objekte blau verfärbt haben, anschließend in fließendem Leitungswasser auswaschen    10-15 Min.
7. Abspüen in Aqua dest.
8. entwässern, Intermedium, Neutralharzeinschluß

Mit Salzsäure differenzierte, also regressiv gefärbte Objekte, zeigen oft eine bessere Kontrastierung als nach progressiver Färbung.

Ansätze :
• Saures Hämalaun nach Mayer (Stammlösung) :
  1g Hämatoxylin in 1000ml Aqua dest. lösen, dann genau 0.2g Natriumjodat und 50g reinen Kalialaun zugeben.
• Hämalaun Gebrauchslösung :
  Zu 100ml der Stammlösung werden 5g Chloralhydrat und 0.1g Zitronensäure zugefügt. Vor Gebrauch filtrieren.
• ammoniakalisches Wasser :
  Zu 100ml Aqua dest. wird 1 Tropfen konz. Ammoniaklösung gegeben.