Mikroskopische Färbemethoden
Botanik
Safranin-Echtgrün-Färbung
Benötigte Chemikalien :
Safranin O (C.I.50240), Echtgrün FCF (C.I.42053), Ethanol, abs. Isopropanol
Bemerkung :
Zum Entwässern Isopropanol verwenden, Ethanol löst den Farbstoff aus den Schnitten.
Für den Ethanol kann denaturierter Ethanol verwendet werden aber kein Brennspiritus.
Literatur :
BoMT S.127
Arbeitsablauf :
- Schnitte aus 92%igem Alkohol in die Safranin-Lösung ca. 24 Std.
- Mit fließendem Leitungswasser solange spülen bis dieses vollkommen farblos abläuft.
- Spülen in 92%igem Ethanol bis keine Farbwolken mehr abgehen.
- Echtgrün-Lösung: Nur einige Sekunden (5-10 sek.) die Lösung färbt sehr schnell.
- Die Färbung ist beendet wenn nur noch die verholzte Zellwände, Nucleoli und Chromosomen rot sind.
Mikroskopische Kontrolle.
- Unterbrechen durch gründliches aber nicht zu lange dauerndes Spülen in 95%igem Isopropanol.
- Entwässern in abs. Isopropanol
- Intermedium, Einschluß.
Ergebnis :
Zellkerne mit dichtem Chromatin, Chromosomen, Nucleoli und verholzte Zellwände rot.
Cytoplasma, Kernmembranen und Cellulosewände grün.
Ansätze :
- Safranin-Lösung : 1g Safranin O in 100ml 50%igen Ethanol lösen.
Lösung ist haltbar, muß aber ab und zu filtriert werden.
- Echtgrün-Lösung : 0.1g Echtgrün FCF werden in 100ml 92%igem Ethanol gelöst
und anschließend filtriert.