Mikroskopische Färbemethoden                  Botanik / Zoologie

Bemerkung :
Vorbedingung für eine gute Safranin-Kernfärbung ist Chromsäurefixierung oder Chromsäurebeize.

Literatur :  
Prakt.Mikrosk. 13, 121 (1935)

Arbeitsablauf :
1. Schnitte auf Deckgläser aufziehen und min. 24 Std. im Wämeschrank bei 35-40 °C trocknen lassen, sodaß die Schnitte durch Adhäsion fest haften.
2. Entparaffinieren in Xylol (1 mal wechseln) und dann in 96%igen Isopropanol überführen.
3. (>> Evtl. Chromsäurebeize für 10-15 min. und anschließend gut wässern <<)
4. Färben mit Safraninlösung, durch Aufträufeln auf die Deckgläser.    10-15 min.
5. Abspülen in 50%igem Ethanol
6. Differenzieren in 70%igem Ethanol, bis die Schnitte schwach rosa erscheinen.
7. 96%iger Ethanol    1 min.
8. Ethanol abkippen und die gut alkoholfeuchten Schnitte in Nelkenölblau bringen. Deckglas in der Nelkenölblaulösung leicht umschwenken. Je nach Schnittdicke    15 Sek.- 5 Min.
   (Der Alkohol muß auf jeden Fall verdrängt sein)
9. Färbung mit Terpineol unterbrechen. (Falls die Blaufärbung zu stark ausgefallen ist, in 96% Ethanol differenzieren und evtl. zurück in die Nelkenölblaulösg.)
10. Terpineolstufe    2-4 min.
11. In Xylol gut spülen.
12. Pikroxylol    1-5 sek.
13. In Xylol gut auswaschen (3-4 mal wechseln), Einschluß.

Ansätze :
• Safranin-Stammlösung : 2g Safranin O werden in 100ml 50%igem Ethanol gelöst.
  Die Stammlösg. ist lange Zeit haltbar, muß aber ab und zu filtriert werden.
• Safraninlösung : Zur Färbung verdünnt man 2ml der Safranin-Stammlösung mit 8ml 50%igem Ethanol.
• Nelkenölblau : Nelkenöl in dem etwas Methylenblau oder Anilinblau bis zur tiefdunkelblaugrünen Färbung gelöst wird. Haltbar.
• Pikroxylol : In 100ml Xylol werden 0.2g wasserfreie Pikrinsäure gelöst.
• Chromsäurebeize : 1%ige wäßrige Lösung von Chrom(VI)-oxid.
  
  © by Armin Eisner