Aldehydfuchsin-Dreifachfärbung

Mikroskopische Färbemethoden Zoologie

Benötigte Chemikalien :
Aldehydfuchsin (=Paraldehydfuchsin), Pontacylblauschwarz SX (C.I. 20470), Echtgelb O (C.I. 13015), Kaliumdichromat, Eisessig, Ethanol 96%ig, abs. Isopropanol, Xylol

Bemerkung :
Objekte in Bouin, Zenker oder Formalin fixieren.
Denaturierter Ethanol kann verwendet werden aber kein Brennspiritus.

Literatur :
ChromaWS S.56

Arbeitsablauf :

Schnitte entparaffinieren und in 70%igen Ethanol bringen.

Färben in Aldehydfuchsin-Gebrauchslösung 30 Min.

Waschen in 70%igem Ethanol und übertragen in Wasser.

Färben in Pontacylblauschwarzlösung 15 Min.

Waschen in Wasser

Differenzieren in 70%igem Ethanol bis keine Farbwolken mehr abgehen.

Färben in Echtgelblösung 5 Min.

Waschen in 96%igem Ethanol

Entwässern mit abs. Isopropanol

Aufhellen in Xylol

Harzeinschluß

Ergebnis :
Kerne blaugrün, Collagene Fasern leuchtend gelb, Elastische Fasern dunkelrot, Cytoplasma gelb bis grün, Mucin rötlich purpur.

Ansätze :

Aldehydfuchsin-Stammlösung : Gesättigte Lösung von Aldehydfuchsin in 70%igem Ethanol. Diese Stammlösung ist haltbar
Vorschrift zum Herstellen von Aldehydfuchsin (= Paraldehydfuchsin )
Der Farbstoff sowie die fertige Stammlösung ist auch bei Chroma erhältlich.

Aldehydfuchsin-Gebrauchslösung : 25ml Aldehydfuchsin-Stammlösung mit 75ml Ethanol 70%ig verdünnen und 1ml Eisessig zusetzen. Die Gebrauchslösung ist ca. 1 Monat haltbar.

Pontacylblauschwarzlösung : 0.6g Pontacylblauschwarz SX und 0.4g Kaliumdichromat in 80ml Aqua dest. lösen.

Echtgelblösung : 2g Echtgelb O werden in 100ml 96%igem Ethanol gelöst.