Karminfärbung nach Best

Mikroskopische Färbemethoden Zoologie

Benötigte Chemikalien :
Saures Hämalaun nach Mayer oder Hämatoxylin nach Ehrlich , Karmin (Carmin rubrum optimum C.I. 75470), Kaliumcarbonat, Kaliumchlorid, Ammoniaklösung 25%ig, Methanol, Ethanol 80%ig, Isopropanol 100%, Xylol

Bemerkung :

Literatur :
MT48 §1103, MT89 S.211

Arbeitsablauf :

Schnitte entparaffinieren und in Aqua dest. bringen.

Intensive Kernfärbung mit saurem Hämalaun nach Mayer oder Hämatoxylin nach Ehrlich.

Gründlich Auswaschen in Leitungswasser.

Färben in Bests Karmingebrauchslösung 5-20 Min.

Direktes Übertragen in das Differenziergemisch, wenige Sek. bis Min.
(bis keine Farbwolken mehr abgehen)

Abspülen in 80%igem Ethanol.

Entwässern in abs. Isopropanol

Xylol, Einschlußharz

Ergebnis :
Kerne blau bis violett, Glykogen intensiv rot

Ansätze :

Karminstammlösung nach Best: 2g Carmin rub. opt. und 5g Kaliumchlorid werden in 60ml Aqua dest. unter Erwärmen gelöst. Anschließend werden 1g Kaliumcarbonat zugegeben und einige Min. gekocht.
Vorsicht schäumt stark ! Der Farbton schlägt dabei nach dunkelrot um.
Nach dem Erkalten werden 20ml 25%ige Ammoniaklösg. zugegeben. Die Lösung ist sofort gebrauchsfertig und hält sich gut verschlossen und kühl aufbewahrt ca. 2 Monate.

Bests Karmingebrauchslösung : 20ml filtrierte Stammlösung, 30ml 25%ige Ammoniaklösung und 30ml Methanol werden zusammengemischt.
Die Gebrauchslösung ist nur wenige Tage haltbar.

Differenziergemisch : Mischung aus 40ml Methanol, 93.2ml 80%igem Ethanol und 85ml Aqua dest.